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一文了解蛋白酶K!

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  • 发布时间:2022-11-01 14:45
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【概要描述】与行业里的那些脍炙人口的DNA聚合酶、RNA聚合酶等相比,蛋白酶K显得很低调,以至于我们长期忽视了它的重要性。随着这次新冠疫情的爆发,蛋白酶K的需求量暴增,国内外的供应量远跟不上消耗量,大家才突然意识到蛋白酶K是如此的重要。

一文了解蛋白酶K!

【概要描述】与行业里的那些脍炙人口的DNA聚合酶、RNA聚合酶等相比,蛋白酶K显得很低调,以至于我们长期忽视了它的重要性。随着这次新冠疫情的爆发,蛋白酶K的需求量暴增,国内外的供应量远跟不上消耗量,大家才突然意识到蛋白酶K是如此的重要。

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与行业里的那些脍炙人口的DNA聚合酶、RNA聚合酶等相比,蛋白酶K显得很低调,以至于我们长期忽视了它的重要性。随着这次新冠疫情的爆发,蛋白酶K的需求量暴增,国内外的供应量远跟不上消耗量,大家才突然意识到蛋白酶K是如此的重要。

蛋白酶K / 是什么?

蛋白酶K(Proteinase K),属丝氨酸蛋白酶类,1974年,Wolfgang Ebeling等利用沉淀、离子交换层析和凝聚层析等方法在林伯氏白色念球菌的培养基中分离纯化出蛋白酶K。因能合成该种蛋白酶的微生物能在以角蛋白(Keratin)为唯一碳氮源的环境中生长,即能够消化角蛋白,因此被命名为蛋白酶K(Proteinase K)。蛋白酶K由一条肽链组成,包含277个氨基酸残基,相对分子质量为28.9kDa。蛋白酶K家族包含了各种由真菌、酵母及革兰氏阴性细菌分泌的细胞内肽酶。

蛋白酶K具有稳定的结构、极高的酶活力和广泛的底物特异性,但偏好于带有脂肪族及芳香烃的肽链,能优先分解与疏水性氨基酸、含硫氨基酸、芳香族氨基酸羧基端连接的肽键。与其它的蛋白酶相比较,蛋白酶K具有高活力和高稳定性,其酶活不会被尿素、SDS和EDTA等变性剂抑制,且在高温、高盐或较高的pH等条件下,蛋白酶K仍能保持较高活性。因该酶在较广的pH范围(4~12.5)内及高温(50~70℃)均有活性,在提取DNA和RNA的缓冲液中具有很高的活性,可用于质粒或基因组DNA、RNA的分离,是DNA提取的关键试剂。

蛋白酶 K 是现有蛋白酶中活性最高的品种,在 pH 4 到 pH 12 的条件下均有活性,反应温度介于 0~75oC 之间。在常用浓度的 SDS、尿素或 EDTA 存在时亦很稳定。酶切割位点在脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键,可以用于所有蛋白质的降解。

蛋白酶K /国家标准

《蛋白酶K》(GB/T 34793-2017)是2018年5月1日实施的一项中华人民共和国国家标准,归口于中国标准化研究院。《蛋白酶K》(GB/T 34793-2017)规定了蛋白酶K产品的术语和定义、技术要求、试验方法、检验规则、标志、包装、运输及贮存。《蛋白酶K》(GB/T 34793-2017)适用于生化试剂蛋白酶K产品的生产和检测。

 

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